Prévalence quasi-universelle de la pneumocystose et augmentation associée du mucus dans les poumons des nourrissons ayant une mort soudaine et inattendue

Contexte Une pneumocystose sans pathologie évidente évidente est occasionnellement rapportée dans les poumons autopsiés du nourrisson. Sa prévalence et sa signification sont inconnues. Cette infection légère induit une forte activation des gènes liés à la sécrétion de mucus chez les jeunes rongeurs immunocompétents qui n’a pas été explorée chez les nourrissons. Nous avons entrepris la caractérisation de la prévalence de Pneumocystis et du mucus associé dans les poumons des nourrissons. Méthodes Des échantillons de nourrissons ont révélé l’âge moyen, les jours qui sont morts soudainement et de manière inattendue à Santiago pendant – ont été examinés pour Pneumocystis par amplification en chaîne par polymérase nPCR Amplification nPCR du gène de l’ARN ribosomique P jirovecii mtLSU et microscopie par immunofluorescence IF Les nourrissons à Pneumocystis-négatifs âgés de 1 an et plus et leurs positifs les plus proches ont été étudiés pour l’expression de MUCAC et la charge de Pneumocystis par W blot externe et PCR quantitative, respectivement Résultats L’ADN de Pneumocystis a été détecté par nPCR chez les nourrissons% et les organismes Pneumocystis ont été visualisés par IF chez% des nourrissons ADN-positifs. L’infection était la plus fréquente à mois avec% nourrissons de cet âge testant MUCAC positif était significativement augmenté dans les échantillons de tissus positifs pour Pneumocystis P = La mort était inexpliquée chez les nourrissons%; Pneumocystis a été détecté en% d’entre eux vs de% avec décès expliqué P = Conclusions Une infection hautement focale de Pneumocystis associée à une augmentation de l’expression du mucus est presque universellement présente dans les poumons des nourrissons décédés de façon inattendue dans la communauté indépendamment du diagnostic d’autopsie

immunocompétent, réponse immunitaire non spécifique, autopsie, MUCAC, syndrome de mort subite du nourrisson SIDSSe le commentaire éditorial par Eddens et Kolls, sur les pages -La plupart des humains éprouvent leur premier contact avec Pneumocystis ie infection primaire peu de temps après la naissance diagnostiqué parce qu’il est asymptomatique ou peut se présenter comme une légère infection des voies respiratoires supérieures Les rapports d’autopsie de Pneumocystis chez les nourrissons sont disponibles depuis de nombreuses années Cependant, la caractérisation de cette infection a été entravée par l’absence d’une méthode de culture microbiologique pour Pneumocystis. , par la faible sensibilité de toute méthode utilisée pour diagnostiquer Pneumocystis pneumonia dans l’immunodéprimé pour détecter les plus petites quantités de ce champignon chez les individus immunocompétents, et parce que les kystes Pneumocystis ne se colorent pas avec la coloration standard hématoxyline-et-éosine couramment utilisée dans la plupart des autopsies. les études d’autopsie décrivent la distribution histologique localisée focale et que cette inf ection est plus fréquente entre les âges et les mois [,, -] Cette tranche d’âge coïncide avec l’âge le plus fréquent de mort subite inattendue du nourrisson SUID et bronchiolite Cependant, l’étendue de la couverture de cet âge se chevauche et Pneumocystis induit une réponse immunitaire puissante chez les jeunes rongeurs immunocompétents [, -], y compris une forte activation génique de ClCa, un membre de la famille des canaux chlorure de calcium activés par le calcium exprimée dans l’épithélium des voies respiratoires des gobelets cellule qui se rapporte à la sécrétion de mucus Mucus est produit de manière constitutive par les cellules caliciformes et lie pratiquement toutes les particules qui atterrissent dans l’épithélium des voies respiratoires comme composant essentiel du système de clairance mucociliaire visant à nettoyer les voies aériennes des particules inhalées. , une couche liquide PCL periciliaire où les cils se déplacent pour stimuler le mucus, et le ove propulsé La hauteur de la PCL et des couches de mucus doit être ajustée pour assurer la perméabilité des voies respiratoires tout en conservant une efficacité de clairance Un PCL excessif soulève la couche de mucus flottante, la rendant inaccessible aux cils pour la propulsion et l’accumulation de mucus peut occlure voies aériennes étroites, en développement et distales La libération de mucus est une réaction de défense des voies aériennes stimulée par des voies non spécifiques par plusieurs voies respiratoires Une augmentation du mucus associée à Pneumocystis suggérerait un rôle cofacteur de Pneumocystis dans la maladie pulmonaire de l’hôte immunocompétent Par conséquent, nous avons entrepris cette étude transversale pour décrire la prévalence, la répartition par âge et la réponse associée au mucus à l’infection primaire par Pneumocystis dans les poumons autopsiés du nourrisson.

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Examen éthique

Cette étude a été approuvée par les commissions d’éthique de la zone métropolitaine de santé du Nord et de l’école de médecine de l’Université du Chili à Santiago

Population étudiée et collecte de données

Le Servicio Médico Legal à Santiago est l’institution du bureau des coroners pour la zone métropolitaine du Chili Une autopsie médico-légale est requise pour les nourrissons décédés dans la communauté au Chili Des autopsies infantiles effectuées pendant les visites d’un médecin spécialisé en thanatologie MG entre mai et juillet Le protocole médico-légal a pris en compte l’histoire clinique, l’examen macroscopique et la dissection avec prélèvement histologique des principaux organes, ainsi que les tests de laboratoire, y compris les déterminations toxicologiques. Les diagnostics d’autopsie ont été recueillis à partir du rapport du coroner avant les analyses de Pneumocystis. Les diagnostics d’autopsie ont été catégorisés dans le cadre de cette étude comme mort inexpliquée sans nageoire anormale. dings à l’autopsie, syndrome de mort subite du nourrisson; mort inexpliquée avec des résultats d’autopsie dont le rôle contributif à la mort était incertain; et expliqué la mort, quand une cause définitive de la mort a été établie Groupes, et correspondrait à SUID ou mort subite inattendue dans l’enfance

Échantillons d’autopsie

Le poumon droit complet a été soigneusement retiré, placé dans un sac en plastique stérile et transporté au laboratoire d’investigation dans un conteneur de glace après obtention des échantillons légalement requis en utilisant un équipement stérile. Chaque poumon a été traité à l’arrivée, un à la fois; La plèvre a été soigneusement retirée pour accéder au tissu intact à l’aide d’un équipement stérile séparé. De petits échantillons ont été prélevés dans le tissu pulmonaire profond à travers des incisions multiples dans la surface décortiquée de chaque lobe. Les échantillons ont été découpés en petits morceaux et distribués pour la réaction en chaîne par polymérase nichée nPCR et microscopie. Les lobes ont été traités et analysés séparément

Échantillons pour la catégorisation des pneumocystes

L’ADN a été extrait et purifié à partir d’une médiane de g moyenne, g de tissu pulmonaire à l’aide du QIAamp DNA Mini Kit Qiagen, Valencia, Californie suivi d’une contamination croisée L’ADN de Pneumocystis jirovecii a été identifié par nPCR Les procédures internes de nettoyage et de stérilisation à l’aide de fluides de rupture d’ADN ADN Away, les produits scientifiques VWR ont été appliqués à l’armoire de biosécurité et les unités de hotte entre chaque poumon ont été catégorisées comme Pneumocystis positive lorsque la bande bp de Pjirovecii a été visualisée. ou plus de spécimens, et comme Pneumocystis négatif si aucun ADN de P jirovecii n’a été documenté dans les lobes Les lobes Pneumocystis-négatifs ont été analysés deux fois, à partir de tissus

Analyses de microscopie

On a homogénéisé une médiane de g moyenne, g de tissu pulmonaire par agitation par agitateur magnétique dans du PBS salin tamponné au phosphate stérile pH à ° C pendant minutes, stérilisé par filtration à la gaze, centrifugé à g, minutes à ° C, et le culot a été reconstitué en μL de PBS pH stérile Des gouttes de 5 microlitres ont été utilisées pour des lames de microscopie Des formes de Pneumocystis ont été identifiées en utilisant le colorant d’immunofluorescence MeriFluo Kit Biosciences, Cincinnati, Ohio chez les nourrissons Chaque échantillon a été analysé séparément et aveuglé aux résultats nPCR nourrisson ont été analysés en double pour chaque lobe

Méthodes de microscopie supplémentaires

Le premier des échantillons infantiles a été étudié en utilisant Gomori-Grocott methenamine argent et Rapid Giemsa Diff-Quick coloration des empreintes pulmonaires. Pour chaque technique de microscopie, les nourrissons ont été considérés comme «positifs» lorsque les formes typiques de Pneumocystis ont été identifiées et acceptées par les observateurs. CP ou SLV dans ou plus de lobes et « négatif » si les lobes ne contenaient pas de Pneumocystis Interprétation a été réalisée en aveugle aux résultats obtenus en utilisant d’autres techniques Lecture de microscopie a pris jusqu’à minutes par patient

Échantillons pour les quantifications P jirovecii et MUCAC

Des échantillons pulmonaires supplémentaires ont été prélevés chez des nourrissons comprenant tous les nourrissons Pneumocystis-négatifs âgés de plus de jours et des enfants pneumocystis-positifs d’âge plus proche. Les échantillons ont été surgelés, pulvérisés dans de l’azote liquide à l’aide d’un mortier et d’un pilon qPCR et analyse Western blot

Pneumocystis jirovecii Quantification

L’ADN a été extrait d’une aliquote -g Le gène msg multicopie a été sélectionné comme cible en utilisant des amorces PC MSG Forward ‘-CAA AAA TAA CAY TSA CAT CAA CRA GG-‘ et PC MSG Reverse ‘-AAA TCA TGA ACG AAA TAA CCA TTG C- ‘Générant un fragment de bp qui a été cloné dans pGEM-T Easy vecteur Promega, et utilisé pour générer une gamme de courbe d’étalonnage de × à × copies / μL produit amplifié a été détecté en utilisant SYBR Green I Quantace, PCR quantitative Bioscan a été fait dans tripliquer en utilisant le LightCycler Roche avec une période de préincubation de minutes à ° C et des cycles de secondes à ° C, secondes à ° C, et secondes à ° C chacune, se terminant par minutes à ° C Chaque essai comprenait HO ultrapure négatif et ADN positif d’un Patient atteint de pneumonie à Pneumocystis contrôles et différents étalons plasmidiques utilisés dans la courbe d’étalonnage La spécificité des produits amplifiés a été vérifiée par analyse de la courbe de fusion. Le gène de la β-globine humaine a été utilisé comme contrôle interne et pour la normalisation des résultats

Mucin Déterminations

Chaque aliquote g et un témoin d’échantillon de tissu gastrique ont été dissociés en utilisant un tampon Tearor Biospec dans du tampon de lyse modi fi é par RIPA. La protéine totale a été quantifiée dans le surnageant par Bradford Bio-Rad. Les protéines ont été transférées sur des membranes de polyvinylidène difluorure et bloquées par des anticorps IgG anti-MUCAC de souris IgG: M, SCBT et anticorps de chèvre anti-souris IgG peroxydase de raifort HRP:, SCBT ont été utilisés pour la détection MUCAC Les membranes ont été dépouillées, bloqué, et réprouvé en utilisant des anticorps antiactine standard IgG anti-chèvre,:, SCBT et antigoat IgG HRP,:, SCBT Réactif de chimiluminescence Enhanced a été utilisé pour le développement de la membrane Substrat Pierce ECL WB, Thermo Scientific Films ont été analysés avec le logiciel Image J National Institutes of Health

Analyses statistiques

Le logiciel GraphPad Prism San Diego, Californie a été utilisé pour comparer la prévalence de Pneumocystis dans les décès expliqués vs inexpliqués en utilisant χ avec la correction de Yates, les copies de Pneumocystis MSG à intervalles séquentiels en utilisant l’analyse de variance, l’expression de MUCAC selon la présence de Pneumocystis en utilisant t test non apparié avec Welch correction, et pour analyser la corrélation entre l’expression des copies de MUCAC et de Pneumocystis MSG en utilisant la valeur AP de test de Pearson de & lt; était considéré comme significatif

RÉSULTATS

Caractéristiques des nourrissons et des échantillons pulmonaires

Au cours de la période d’enrôlement, MG a effectué une autopsie légalement obligatoire au cours de la période d’enrôlement MG a réalisé des autopsies pour nourrissons remplissant les critères d’admission et où le poumon droit a été soumis à l’analyse Six nouveau-nés signifient âge, jour; médiane, jours; intervalle, – les jours ont été exclus en raison d’une hospitalisation récente et les nourrissons ayant un âge médian de plusieurs mois, les mois ont été pris en compte pour cette étude. Les nourrissons ont été affectés à des catégories diagnostiques spécifiques après l’autopsie constipation. Tableau complet Les poumons droits complets ont été obtenus chez les nourrissons, les lobes chez les lobes et les lobes chez les bébés

Tableau de détection de pneumocystis par réaction de chaîne polymérase nichée dans l’autopsie pulmonaire homogénéisée Échantillons de différents lobes pulmonaires de nourrissons décédés soudainement et de façon inattendue dans la communauté Pneumocystis ADN Contribution au diagnostic-Tout autopsie Lobec Résultat Noa RUL RML ou RLL Total Décès inexpliqué% Mort inexpliquée avec des résultats d’autopsie bénins% Inflammation pulmonaire non spécifique Malformation congénitale compatible avec la vie Anomalie métabolique hypoglycémie Signes d’infection légère et à l’extérieur du poumon Mort expliquée% Bronchopneumonie Malformation congénitale cardiaque ou cérébrale Mort traumatique Asphyxie immersion ou nourriture Signes systémiques d’infection DIVC, méningite, autre Total% b% b% Contribution de l’ADN de Pneumocystis au diagnostic-Tout résultat de l’autopsie de Lobec Noa RUL RML ou RLL Décès total inexpliqué% inexpliqué mort avec de légères altérations d’autopsie% Inflammation pulmonaire non spécifique Malformation congénitale compatible avec la vie Anomalie métabolique hypoglycémie Signes d’infection légère et en dehors du poumon Mort expliquée% Bronchopneumonie Malformation congénitale cardiaque ou cérébrale Mort traumatique Asphyxie immersion ou nourriture Signes systémiques d’infection DIVC, méningite, autre Total % b% b% Abréviations: DIVC, coagulopathie intravasculaire disséminée; RLL, lobe inférieur droit; RML, lobe moyen droit; RUL, lobe supérieur droit Age: moyenne, mo d; médiane, mo d; Pourcentage par rapport aux nourrissons à ADN Pneumocystis pour indiquer que le pourcentage de positifs a été détecté en analysant le RUL et le pourcentage de positifs supplémentaires en analysant les échantillons RML ou RLL Aux fins de cette étude, les nourrissons ont été considérés comme étant négatif pour l’ADN de Pneumocystis après analyse des échantillons dans chaque lobec Prévalence de l’ADN de Pneumocystis parmi les décès inexpliqués vs expliqués, P = View Large

Sensibilité des techniques de diagnostic

Pneumocystis jirovecii ADN a été détecté par nPCR chez les premiers nourrissons étudiés; % d’entre eux testés positifs par microscopie d’immunofluorescence, et% par PCR simple dans la même aliquote tissulaire homogénéisée Diff-Quick et Gomori-Grocott méthenamine argent taches détectées Pneumocystis formes trophiques en% et formes kystiques en%, des empreintes de tissus pulmonaires

Le diagnostic de Pneumocystis dans des échantillons de biopsie infantile nécessite des techniques sensibles appliquées au tissu homogénéisé: Pourcentage de détection de Pneumocystis par rapport à la réaction en chaîne de polymérase n-PCR nichée, de microscopie par immunofluorescence IF et de PCR à cycle unique dans des échantillons de tissus pulmonaires homogénéisés Résultats des lectures de microscopie utilisant Giemsa Diff-Quick et Gomori-Grocott méthinamine argent GMS taches dans des empreintes de tissu pulmonaire à surface cruent-adjacente aux sections analysées par n-PCR et IF sont également présentés Abréviations: IF, microscopie à immunofluorescence; GMS, Gomori-Grocott methenamine argent; n-PCR, réaction de polymérisation en chaîne imbriquée; Le diagnostic de Pneumocystis dans des échantillons de biopsie infantile nécessite des techniques sensibles appliquées aux tissus homogénéisés: Pourcentage de détection de Pneumocystis par rapport à la réaction en chaîne de la polymérase n-PCR, de la microscopie par immunofluorescence IF et de la PCR à cycle unique dans les poumons homogénéisés. Résultats des lectures de microscopie utilisant des colorations GMS rapides de Giemsa Diff-Quick et Gomori-Grocott GMS dans des empreintes de tissus pulmonaires à surface coupée adjacente aux coupes analysées par n-PCR et IF sont également présentées Abréviations: IF, microscopie à immunofluorescence; GMS, Gomori-Grocott methenamine argent; n-PCR, réaction de polymérisation en chaîne imbriquée; PCR, réaction en chaîne de la polymérase

Figure Vue largeDownload de cette infection hautement focale de Pneumocystis par examen microscopique dans des préparations homogénéisées ou des empreintes de tissus pulmonaires. Formes de pneumocystis visualisées par microscopie en utilisant une coloration d’immunofluorescence dans des aliquotes d’échantillons de biopsie pulmonaire homogénéisés F = ×; C et I = ×, ou par la coloration de Giemsa rapide Diff-Quick dans les empreintes des sections A, D et G = × de l’échantillon d’autopsie du nouveau poumon; B, F, et H = × Les flèches sur chaque × image pointent vers leurs grossissements × Bar = μFigure Vue largeDownload slideDétection de cette infection hautement focale de Pneumocystis par examen microscopique dans des préparations homogénéisées ou des empreintes de spécimens de tissu pulmonaire Formes de pneumocystis visualisées par microscopie par immunofluorescence coloration dans des aliquotes de spécimens de biopsie pulmonaire homogénéisés F = ×; C et I = ×, ou par la coloration de Giemsa rapide Diff-Quick dans les empreintes des sections A, D et G = × de l’échantillon d’autopsie du nouveau poumon; B, F et H = Les flèches sur chaque image × pointent sur leurs grossissements × Bar = μ

Amplification de l’ADN

La PCR nichée a détecté l’ADN de P jirovecii chez% des nourrissons:% des nourrissons mâles et% des femelles. L’ADN jirovecii pneumocystique a été détecté chez% des nourrissons dont les lobes ont été analysés; d’entre eux,%,% et% avaient un ADN de P jirovecii détectable dans, ou des lobes, respectivement. La première analyse a détecté% des nourrissons dont le lobe supérieur droit était P Jirovecii ADN positif L’ADN de Pneumocystis jirovecii a été détecté chez les nourrissons & lt; Mois d’âge Figure Toutes les réactions d’amplification des contrôles de contamination de l’extraction et de la purification de l’ADN ont été négatives

Les échantillons d’autopsie des poumons des nourrissons qui mouraient dans la communauté ont été analysés pour P jirovecii en utilisant la réaction en chaîne de la polymérase nichée nPCR et en microscopie à immunofluorescence. L’ADN de IF P jirovecii a été détecté en% et les formes Pneumocystis ont été détectées. confirmé par IF en% de ceux trouvés positifs pour l’ADN de P jirovecii par nPCR et chez les nourrissons qui ont été testés négatifs Chaque barre représente un minimum de nourrissons Pneumocystis a également été détecté chez, de, de, de, et de nourrissons mourant à, Les pics d’autopsie des poumons des nourrissons qui meurent dans la communauté ont été analysés pour P jirovecii en utilisant la réaction en chaîne de la polymérase nichée nPCR et microscopie par immunofluorescence IF P jirovecii ADN a été détecté en%, et les formes de Pneumocystis ont été confirmées par I F en% de ceux trouvés positifs pour l’ADN de P jirovecii par nPCR et chez les nourrissons qui ont été testés négatifs Chaque barre représente un minimum de nourrissons Pneumocystis a également été détecté chez,,,,,,, et des nourrissons mourants à,, ,, et mois d’âge, respectivement

Analyses de microscopie

Des échantillons d’homogénat pulmonaire provenant des nourrissons ont été analysés par microscopie à immunofluorescence en plus de nPCR, et des formes trophiques kystiques et pneumatiques plus petites ont été détectées chez des nourrissons testés positifs par nPCR L’immunofluorescence était négative chez tous les nourrissons présentant un ADN Pneumocystis négatif selon le tableau nPCR; Figure

Quantification de Pneumocystis

Numération normalisée par Pneumocystis Les copies de MSG par nanogramme d’ADN humain étaient plus élevées entre les mois et diminuaient par la suite P = Figure

La progression des organismes Pneumocystis en autopsie Les résultats des tests de polymérase en chaîne par polymérase de Pneumocystis MSG ont été normalisés en nanogrammes de β chez l’humain. -Globine ADN pour les comparaisons et exprimé comme la moyenne normalisée de Pneumocystis MSG copies ± SDFigure View largeDownload slidePneumocystis organismes fardeau augmente jusqu’à-mois de l’âge du nourrisson et diminue par la suite L’évolution des organismes Pneumocystis charge dans l’autopsie des échantillons pulmonaires des nourrissons meurent soudainement dans la communauté est montré Pneumocystis MSG résultats de la réaction en chaîne de la polymérase quantitative ont été normalisés à nanogrammes de l’ADN de la β-globine humaine pour les comparaisons et exprimée comme la moyenne normalisée de Pneumocystis MSG copies ± SD

MUCAC Déterminations

Les niveaux normalisés de MUCAC ont été significativement augmentés P = en association avec la présence de Pneumocystis Figure Cette augmentation était cohérente à tous les âges, données non montrées, et indépendantes de la charge de Pneumocystis Pearson r =; Les valeurs de détermination de P = MUCAC ont été normalisées par l’expression de la protéine d’actine humaine, et les déterminations de Pneumocystis MSG par les taux de β-globine humaine signifient ± SD

Figure Vue largeTélécharger la diapositiveMucus L’expression de MUCAC est augmentée par la présence de Pneumocystis et non influencée par la charge de l’organisme. Haut: Expression de la protéine MUCAC selon l’état de Pneumocystis dans les échantillons de tissu pulmonaire chez les nourrissons P jirovecii et P. jirovecii négatif. Les valeurs du niveau de MUCAC ont été normalisées par l’expression de la protéine d’actine humaine, et les déterminations du MSG de Pneumocystis par les niveaux de β-globine humaine signifient ± SD Abréviation de l’expression protéique et valeurs de quantification normalisées de P jirovecii MSG dans le même échantillon pulmonaire. : MUCAC, mucusFigure View largeTélécharger slideMucus L’expression de MUCAC est augmentée par la présence de Pneumocystis et non influencée par la charge de l’organisme Haut: Expression de la protéine MUCAC selon l’état de Pneumocystis dans les échantillons de tissus pulmonaires chez les nourrissons P jirovecii et P jirovecii négatifs entre les expressions de protéines MUCAC normalisées valeurs de quantification normalisées de P jirovecii MSG dans le même échantillon pulmonaire spécimen pour chaque nourrisson Pearson r =, P = MUCAC valeurs de niveau ont été normalisées par l’expression de la protéine actine humaine, et Pneumocystis MSG déterminations par les niveaux de β-globine humaine moyenne ± SD Abréviation: MUCAC, mucus

DISCUSSION

Les récepteurs des voies respiratoires supplémentaires n’ont pas été étudiés Le MUAC a été régulièrement augmenté chez les nourrissons Pneumocystis-positifs à tous les âges, ce qui suggère que Pneumocystis prédispose l’hôte à des réponses accrues du mucus pendant cette période. La pathogenèse de Pneumocystis est principalement dépendante de l’hôte [,,] Pathogéniquement, les mucines sont des protéines fortement glycosylées stockées dans des granules intracellulaires d’emballage Leur libération en réponse à des voies respiratoires Ce mécanisme pourrait représenter un risque pour les voies aériennes du nourrisson étroites et en développement parce que des changements mineurs de volume de hauteur dans le liquide de surface des voies respiratoires peuvent conduire à une petite fermeture des voies aériennes chez les nourrissons. fois aussi court qu’un cycle respiratoire Les résultats cliniques de i Les nourrissons ont des voies respiratoires de petit diamètre, avec une plus grande élasticité et conformité, moins de voies aériennes latérales et une capacité résiduelle fonctionnelle réduite, comparativement à En outre, les mucines chez les nourrissons sont plus acides, ce qui peut refléter une plus grande viscosité La présence de Pneumocystis pourrait donc favoriser l’effondrement des voies respiratoires suggéré comme un mécanisme dans les hypothèses actuelles pour SUID L’effondrement des voies respiratoires serait difficile à diagnostiquer à l’autopsie car il peut se résoudre immédiatement avec la relaxation post-mortem des voies respiratoires. En outre, l’orientation gravitationnelle des poumons et la libération de la pression transpulmonaire à l’ouverture du thorax peuvent mobiliser les voies aériennes. sécrétions et diminuer davantage les preuves d’autopsiePneumocystis est commun dans les genres Par conséquent, l’augmentation du mucus associée à Pneumocystis peut également être pertinente pour les maladies respiratoires chroniques telles que la bronchopneumopathie chronique obstructive et la fibrose kystique dans lesquelles la coexistence d’un excès de mucus et de Pneumocystis est décrite [,,] D’autres voies augmentent la mucine. à l’EGFR dans la famille des récepteurs ErbB, et comprennent le facteur de nécrose tumorale α, STAT, interleukine β, interleukine et NF-κB et peuvent être activés par Pneumocystis [,,,] En outre, Pneumocystis peut induire une sensibilisation collatérale à un non spécifique antigène chez les souris immunocompétentes, augmentant le nombre de cellules présentatrices d’antigène CDCDc qui expliquent une réponse hyper-réactive lors d’une épreuve ultérieure Une réponse hyperréactive des voies respiratoires peut expliquer l’effondrement des voies aériennes tel que documenté chez les souris sensibilisées. SUID et la bronchiolite infantile dont les pics d’incidence coïncident avec le pic d’âge de Pneumocystis [,,,] Cette étude d’autopsie a été menée en La prévalence de la pneumocystose n’a pas été différente chez les nourrissons avec des décès inexpliqués ou expliqués dans cette étude, en accord avec une étude antérieure documentant une incidence similaire de Pneumocystis chez les nourrissons La prévalence élevée de Pneumocystis dans le SUID, cependant, soulève la possibilité que Pneumocystis puisse être une cause «nécessaire mais non suffisante». de SUID en tant que coadjuvant à divers déclencheurs non spécifiques agissant sur PneumocystisPathology rapports dans cette étude ont montré que l’inflammation était absente ou trop douce pour expliquer les décès infantiles par des mécanismes inflammatoires, comme dans les séries d’autopsie précédentes n’explique pas la mort sont présents dans environ la moitié des cas SUID L’absence d’inflammation évidente chez ces nourrissons peut s’expliquer par la mort avant que l’inflammation ne se développe, ou par d’autres raisons, y compris la focalisation de l’infection Les modèles animaux démontrent que la séquence des événements menant à la réponse lymphocytaire est bien délimitée. lors d’infections à faible charge comme celle-ci, jusqu’à ce que Pneumocystis se multiplie et soit capable d’induire l’inflammation transitoire qui élimine le pathogène chez l’hôte immunocompétent L’effondrement des voies respiratoires peut être favorisé par une augmentation du mucus. ,], suggérant que la prévention du mucus associé au Pneumocystis augmente jusqu’à ce que les voies respiratoires soient plus développées pourrait réduire la vulnérabilité au SUID et, éventuellement, à la bronchiolitePneumocystis est le microorganisme le plus répandu dans les poumons des petits nourrissons. les enfants plus âgés ou les adultes souffrant de maladies respiratoires associées à Pneumocystis et mucus soulagé

Remarques

Remerciements Nous reconnaissons le travail dévoué d’Isabella Eyzaguirre Valderas et de Maria Antonieta Perez Concha dans le cadre de leur thèse de doctorat, et remercions les Docteurs Jaime Fergie et Mauricio Henríquez pour leur critique du manuscrit. Nous remercions particulièrement Walter T Hughes pour ses conseils constants et pour son examen critique des contributions du manuscrit, SLV était responsable de l’hypothèse, de la recherche documentaire et de la rédaction du manuscrit; S L V, C A P, F P, J-F A, R B, M C, I D-J, P I, E-M A et E D-C ont conçu la catégorisation des échantillons pulmonaires faisant partie de l’étude; S L V, C A P, F P, J-F A et R B ont conçu la partie mucus de l’étude; M G a effectué les autopsies; C A P, M G, F P, J-F A, R B et S L V ont effectué les déterminations; S L V, C A P, F P, R F M et P I ont analysé et interprété les données; RFM, CAP, FP, JF A, RB, MC, MG, I DJ, PI, EM A, et EDC revu en profondeur le document SLV est le garant de l’étudeFinancial support Ce travail a été soutenu par le Fondo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico FONDECYT -Chile et la SLV La collaboration entre les groupes français et chiliens a été soutenue par le ministère français de la Coopération et par la subvention de voyage ECOS-CONICYT CS à E DC et SLV La collaboration avec RFM a été soutenue par des fonds de professeurs invités inclus dans le numéro FONDECYT-Chili. SLV et par des fonds de voyage de University College London à RF MPotentiel conflits d’intérêts Tous les auteurs: Aucun conflit signaléTous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts Conflits potentiels que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués